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Tipo do documento: Dissertação
Title: Fungos entomopatogênicos isolados de solos de um fragmento de Mata Atlântica
Other Titles: Entomopathogenic fungi isolated from soil of a fragment of the Atlantic Forest
Authors: Esparza Mora, Margy Alejandra
Orientador(a): Fraga, Marcelo Elias
Primeiro membro da banca: Fraga, Marcelo Elias
Segundo membro da banca: Silva, Vinicius Siqueira Gazal e
Terceiro membro da banca: Araújo, Maria do Carmo de
Keywords: Beauveria bassiana;Metarhizium anisopliae;controle biológico;inimigos naturais;biodiversidade;virulência;biological control;natural enemies;biodiversity;virulence
Área(s) do CNPq: Agronomia
Idioma: por
Issue Date: 26-Oct-2015
Publisher: Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro
Sigla da instituição: UFRRJ
Departamento: Instituto de Ciências Biológicas e da Saúde
Programa: Programa de Pós-Graduação em Fitossanidade e Biotecnologia Aplicada
Citation: ESPARZA MORA, Margy Alejandra. Fungos entomopatogênicos isolados de solos de um fragmento de Mata Atlântica. 2015. 137 f. Dissertação (Mestrado em Fitossanidade e Biotecnologia Aplicada) - Instituto de Ciências Biológicas e da Saúde, Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, Seropédica - RJ, 2015.
Abstract: Os fungos entomopatogênicos desempenham um papel importante na regulação de populações de insetos incluindo pragas agrícolas e florestais. Os fungos anamórficos dos gêneros Beauveria, Metarhizium e Isaria apresentam o maior potencial para o uso em controle biológico. O objetivo foi caracterizar as populações de fungos entomopatogênicos isolados de solos, determinar a ocorrência das espécies patogênicas de insetos da ordem Hypocreales, bem como avaliar o potencial de controle biológico. Foram coletadas dez amostras compostas de solo durante os períodos chuvoso e seco, no Parque Municipal Natural do Curió em Paracambi, RJ. O isolamento dos fungos entomopatogênicos foi por dois métodos: com larvas isca - Galleria mellonella (Lepidóptera: Pyralidae) e Tenebrio molitor (Coleóptera: Tenebrionidae), e meios seletivos - Ágar Batata Dextrose suplementado com tegumento de T. molitor (BDA+TI) e Meio Martin. Após o isolamento, 216 fungos entomopatogênicos foram identificados utilizando critérios macroscópicos e microscópicos em BDA e MEA. A análise molecular das cepas mais virulentas foi realizada através do sequenciamento das regiões ITS1 e ITS4. A patogenicidade de 8 isolados entomopatogênicos foi avaliada usando larvas G. mellonella e T. molitor. As larvas foram imersas durante um minuto em concentrações de 1x106, 1x107, 1x108 e 1x109 conidios.mL-1. Foi observado que o 88,0% dos isolados eram provenientes do método isca e 12,0% do método com meios seletivos. A espécie predominante foi Beauveria bassiana isolada com G. mellonella no período seco (36,0%) e chuvoso (36,0%). Metarhizium anisopliae foi mais isolado com larvas de T. molitor no período seco (33,3%) e chuvoso (32,0%). Beauveria bassiana foi menos prevalente no meio Martin, observando-se uma ocorrência de 13,3% no período seco e 33,3% no período chuvoso. Não foi observado crescimento de M. anisopliae no meio Martin. A ocorrência de B. bassiana no meio BDA+TI foi de 33,3% no período seco e 20,0% no período chuvoso. A maior ocorrência de M. anisopliae (26,7%) foi no período chuvoso usando o meio BDA+TI. De acordo com o teste de patogenicidade as cepas de B. bassiana com maior desempenho para G. mellonella foram Bb53MI e Bb79MI com CL50 de 3,98x107 e 1,04x107 conídios.mL-1, para T. molitor foi Bb79MI com CL50 de 1,03x107 conídios.mL-1. As cepas de M. anisopliae com melhor desempenho foram Ma58MI e Ma10MI tanto para T. molitor (1,0x106 e 1,0x107 conídios.mL-1 respectivamente) como para G. mellonella (6,3x107 e 1,1x108 conídios.mL-1 respectivamente). As linhagens Ma10MI, Ma12MI, Ma58MI e Ma11MI foram identificadas através da caracterização molecular como pertencentes a M. anisopliae e Bb11MI, Bb79MI, Bb53MI e Bb27MI como B. bassiana. O método isca com G. mellonella e T. molitor é um método sensível para o isolamento de fungos entomopatogênicos em solo. Galleria mellonella e T. molitor são susceptíveis à ação patogênica dos fungos B. bassiana, M. anisopliae nas concentrações de 106 a 109 conidios.mL-1.
Abstract: The entomopathogenic fungi play an important role in regulating populations of insects including agricultural and forest pests. The anamorphic fungi Beauveria genera Metarhizium, and Isaria have the greatest potential for use in biological control. The aim was to characterize the populations of entomopathogenic fungi isolated from soil, determine the occurrence of pathogenic species of insects of the order Hypocreales, and assess the potential biological control. Ten samples composed of soil were collected during the rainy and dry seasons, the Municipal Natural Park of Curio in Paracambi, RJ. The isolation of entomopathogenic fungi was by two methods: with bait larvae - Galleria mellonella (Lepidoptera: Pyralidae) and Tenebrio molitor (Coleoptera: Tenebrionidae), and selective media - Potato Dextrose Agar supplemented with T. molitor integument (PDA+IT) and Martin medium. After isolation, 216 entomopathogenic fungi were identified using macroscopic and microscopic criteria in PDA and MEA. Molecular analysis of the most virulent isolates was performed by sequencing of ITS1 and ITS4 regions. The pathogenicity of 8 entomopathogenic isolates was assessed using G. mellonella and T. molitor larvae. The larvae were immersed for one minute at concentrations of 1x106, 1x107, 1x108 and 1x109 conidios.mL-1. It was observed that 88.0% of the isolates were derived from the bait method and 12.0% from the method with selective media. The predominant species was Beauveria bassiana isolated with G. mellonella in the dry season (36.0%) and rainy (36.0%). Metarhizium anisopliae was more isolated with T. molitor during the dry season (33.3%) and rainy (32.0%). Beauveria bassiana was less prevalent in Martin medium, observing an occurrence of 13.3% in the dry season and 33.3% in the rainy season. There was no growth of M. anisopliae in the Martin medium. The occurrence of B. bassiana in the PDA+IT medium was 33.3% in the dry season and 20.0% in the rainy season. The higher ocurrence of M. anisopliae (26.7%) was the rainy season when using the PDA+IT medium. According with the test of pathogenicity strains of B. bassiana with higher performance for G. mellonella were Bb53MI Bb79MI with LC50 3,98x107 and 1,04x107 conídios.mL-1, for T. molitor was Bb79MI with LC50 1,03x107 conídios.mL-1. The strains of M. anisopliae with better performance were Ma58MI and Ma10MI both T. molitor (1,0x106 and 1,0x107 conídios.mL-1 respectively) and for G. mellonella (6,3x107 and 1,1x108 conídios.mL-1 respectively). The Ma10MI, Ma12MI, Ma58MI and Ma11MI strains were identified by molecular characterization as belonging to M. anisopliae and Bb11MI, Bb79MI, Bb27MI and Bb53MI as B. bassiana. The bait method with G. mellonella and T. molitor is a sensitive method for the isolation of entomopathogenic fungi in soil. Galleria mellonella and T. molitor are susceptible to pathogenic action of the fungus B. bassiana and M. anisopliae at the concentrations 106-109 conidios.mL-1.
URI: https://rima.ufrrj.br/jspui/handle/20.500.14407/13531
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