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Tipo do documento: TCC
Title: Anatomia e otimização de protocolos para extração de DNA genômico de madeira de Caryocar glabrum (Aubl.) Pers.
Authors: Moredjo, Priscilla Nascimento
Abreu, Heber dos Santos
Abreu, Heber dos Santos;Borges, Carla Almeida de Souza;Mendonça, Evânia Galvão
Keywords: Piquiarana;Madeira;DNA
Issue Date: 16-Jun-2015
Abstract: O presente estudo teve como objetivo testar três diferentes tipos de protocolos de extração de DNA genômico de madeira seca da espécie Caryocar glabrum (Aubl.) Pers. (Piquiarana), observando também as características anatômicas desta madeira, através de lupa (aumento 10x) e microscopia eletrônica de varredura. O primeiro protocolo utilizado foi uma adaptação de Doyle e Doyle (1990), em que foi utilizado um tampão de extração na seguinte concentração, 2% p/v de CTAB, 2,5% de PVP, 2M NaCl, 100mM Tris-HCl (pH 8,0) e 40μL de β – Mercaptoetanol. O segundo protocolo testado foi o Kit DNeasy Plant Mini. E o terceiro protocolo testado foi uma adaptação de Swetha et al. (2014), onde o tampão de extração utilizado possui a concentração, 100mM Tris base, 20mM EDTA, 3M NaCl, 5% CTAB, 1% PVP e 3μL de β – Mercaptoetanol. Foi verificado que os protocolos 1 e 2 possibilitaram a extração do DNA da madeira de Caryocar glabrum (Aubl.) Pers. (Piquiarana) em quantidades consideráveis, sendo o mais adequado para extrair DNA genômico de espécies nativas tropicais, o protocolo 2, por apresentar um grau de pureza acima de 1,8.
Abstract: The current study aims to test three different types of protocols for genomic DNA extraction of dry wood of the species Caryocar glabrum (Aubl.) Pers. (piquiarana), by observing also the anatomical features of this wood, with the aid of a magnifying glass (10x enlargement) and a scanning electron microscope. The first protocol used was an adaptation of Doyle and Doyle (1990), where an extraction buffer was used with the following concentration, 2% p/v of CTAB, 2,5% of PVP, 2 M NaCl, 100mM Tris HCl (pH 8,0) and 40μL of β – Mercaptoetanol. The second protocol tested was the Kit DNeasy Plant Mini. And the third protocol tested was an adaptation of Swetha et al. (2014), where the extraction buffer contains a concentration of 100mM Tris base, 20mM EDTA, 3M NaCl, 5% CTAB, 1% PVP and 3 μL of β – Mercaptoetanol. It was verified that protocols 1 and 2 allowed the extraction of the DNA of the wood of Caryocar glabrum (Aubl.) Pers. (piquiarana) in considerable quantities, have been to more adequate to extract genomic DNA from native tropical species of which protocol 2 being more suitable, for presenting a purity of more than 1,8.
URI: https://rima.ufrrj.br/jspui/handle/20.500.14407/2989
Appears in Collections:TCC - Engenharia Florestal

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